





分子病理學是與分子生物學、細胞遺傳學等學科相互滲透,在蛋白質和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發病機制、形態變化及功能損害等方面發生和發展規律的新的分支學科,對疾病的病因、發展、發病機制及形態變化,從傳統形態學概念深入至分子或基因水平,分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內容和手段。①細胞特異性mRNA轉錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達和基因組進化的研究;

阻斷內源性過氧化物酶:滴加3%1甲1醇-H2O2,室溫避光孵育15min,將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。
預雜交:滴加預雜交液,37°C孵育1h。
雜交:傾去預雜交液,滴加含探針has-circ-ST6GALNAC6 probe 雜交液,濃度6ng/ul,恒溫箱37度雜交過夜。
雜交后洗滌:洗去雜交液,2×SSC,37°C 洗10min,1×SSC,37°C洗2×5min,0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體較多,可以增加甲酰胺洗滌。
滴加封閉液:滴加封閉血1清(正常兔血1清),室溫30min。
滴加鼠抗地1高辛標記過氧化物酶(anti-DIG-HRP):傾去封閉液,滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育50min,后PBS洗3次×5min。

滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA試劑,避光室溫反應5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。
DAPI復染核:切片滴加DAPI染液,分子病理技術服務,避光孵育8min,沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。
鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發波長330-380nm,發射波長420nm,發藍光;FAM(488)綠光激發波長465-495nm,發射波長515-555 nm,發綠光;CY3紅光激發波長510-560,發射波長590nm,發紅光。)

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