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染色體原位雜交技術(shù)服務(wù)-武漢科銳諾生物

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分子病理診斷,是指應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù),從基因水平上檢測(cè)細(xì)胞和組織的分子遺傳學(xué)變化,以協(xié)助病理診斷和分型、指導(dǎo)靶向、預(yù)測(cè)反應(yīng)及判斷預(yù)后的一種病理診斷技術(shù)。分子病理診斷又稱分子病理檢查、分子病理檢測(cè)、分子病理技術(shù)。從本質(zhì)上講,凡是基于組織和細(xì)胞分子水平上的疾病診斷都是分子病理診斷,這是廣義的分子病理診斷,如組化診斷。但目前公認(rèn)的是狹義的分子病理診斷,即基于細(xì)胞或組織基因水平的病理診斷。

  熒光原位雜交(fluorescenceinsituhybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)基本原理與顯色原位雜交相同,染色體原位雜交技術(shù)服務(wù),不同之處在于FISH是應(yīng)用熒光素標(biāo)記的探針與組織細(xì)胞中待測(cè)核酸反應(yīng)形成雜交體,并采用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察信號(hào)表達(dá)。為了同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶位,在熒光原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來一種新技術(shù),即多彩色熒光原位雜交

原位雜交第三天

1) 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時(shí)以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。

2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。

3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動(dòng),室溫下顯色。

4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開始顯色

5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。

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