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武漢貝科新肽科技有限公司
主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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直接法
將標(biāo)記的特異性熒光，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光，室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法
如檢查未知抗原，雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù)，先用已知未標(biāo)記的特異（）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的，再用標(biāo)記的抗（第二）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成—抗原—復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢為，其它步驟的抗原檢查相同。
原理簡(jiǎn)介
GFP、RFP等熒光蛋白因其的熒光性質(zhì)和靈敏性，常作為報(bào)告基因研究并分析基因產(chǎn)物在細(xì)胞中的定位和相互作用等。將目標(biāo)蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合，通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化技術(shù)或穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，使得該融合蛋白在受體材料細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，目標(biāo)蛋白會(huì)牽引熒光蛋白一起定位到目標(biāo)細(xì)胞器，通過(guò)顯微鏡觀察熒光蛋白在細(xì)胞內(nèi)顯示的位置，確定目標(biāo)蛋白的位置，從而確定目標(biāo)蛋白的亞細(xì)胞定位情況。
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第3年
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