植物鈣離子電鏡技術服務-科銳諾生物
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武漢科銳諾生物科技有限公司
- 主營業務:外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務
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(王經理 先生)
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電鏡中加速電壓VA也是可調的,VA增大時,電子束的波長λ縮短,有利于電鏡分辨力的提高。同時穿透能力增強,對樣品的熱損傷小,但此時會由于電子束與樣品碰撞,導致彈性散射電子的散射角隨之增大,成像反差會因此而有所下降,所以,在不追求高分辨率觀察應用時,選擇較低的加速電壓反而可以獲得較大的成像反差,尤其對于自身反差對比較小的生物樣品,選用較低的加速電壓有時是有利的。

為什么會出現這樣奇怪的現象?為什么更好的分辨率卻沒有得到更真實的圖像?前面我們已經說到,電子束是由掃描線圈的脈沖信號控制,電子束在試樣表面并不是連續掃描,而是逐點跳躍式的掃描。一般掃描電鏡的采集像素比較大,我們會誤以為是連續掃描。既然掃描電鏡是束斑間斷跳躍式的軌跡,那么電子束就有一定的覆蓋面積。
束斑中心的距離取決于放大倍數和采集像素大小。當束斑較大時,束斑覆蓋比較;但是當束斑減小時,束斑的覆蓋區域也越來越小,所以有的特征形貌會從束斑兩個跳躍中心穿過而沒有被覆蓋到,所以相應的形貌特征也不會反映在圖像上,這就造成了信息的丟失。像上述例子,在大倍數小,束斑之間跳躍間距小,足夠覆蓋特征形貌,植物鈣離子電鏡技術服務,但是縮小倍數后,跳躍距離變大,束斑不足以覆蓋所有的特征形貌,有的線條就反映不出來。

由電子發射的電子束可達30keV,經會聚透鏡、物鏡縮小和聚焦,在樣品表面形成一個具有一定能量、強度、斑點直徑的電子束。在掃描線圈的磁場作用下,入射電子束在樣品表面上按照一定的空間和時間順序做光柵式逐點掃描。由于入射電子與樣品之間的相互作用,將從樣品中激發出二次電子。由于二次電子收集極的作用,可將各個方向發射的二級電子匯集起來,再將加速極加速射到閃爍體上,轉變成光信號,經過光導管到達光電倍增管,使光信號再轉變成電信號。這個電信號又經視頻放大器放大并將其輸送至顯像管的柵極,調制顯像管的亮度。因而,再熒光屏上呈現一幅亮暗程度不同的、反映樣品表面形貌的二次電子象。

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