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結(jié)1核病是嚴(yán)重威脅人類健康的傳1染性疾病,每年約有200萬(wàn)人死于該病,其死1亡率在傳1染性疾病中僅低于艾1滋病,隨著醫(yī)1療診斷技術(shù)的迅猛發(fā)展,結(jié)1核病病理診斷經(jīng)歷了單一形態(tài)學(xué)和聯(lián)合特殊染色,到如今利用分子病理基因檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的三個(gè)階段。

我科早在全1國(guó)建立了系統(tǒng)性結(jié)1核病分子病理診斷技術(shù)的平臺(tái),率1先將分子病理診斷技術(shù)在結(jié)1核病中應(yīng)用并推廣,解決了傳統(tǒng)病理對(duì)菌陰肺結(jié)1核及肺外結(jié)1核病的診斷率低、結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病無(wú)法鑒別以及耐藥結(jié)1核病無(wú)法診斷等難題。同時(shí),我科作為中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)1核病學(xué)分會(huì)金1牌病理培訓(xùn)基地,負(fù)責(zé)組織制定了結(jié)1核病病理診斷規(guī)范、培訓(xùn)了大量的專1業(yè)技術(shù)人員,為形成結(jié)1核病病理學(xué)綜合診治新模式做出了卓1越貢獻(xiàn)!

熒光定量PCR(realtimePCR)技術(shù)是近幾年基于普通PCR技術(shù)發(fā)展的一種新技術(shù)。它借助熒光信號(hào)來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物,通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,在擴(kuò)增過(guò)程中,每經(jīng)過(guò)一次循環(huán),熒光定量PCR儀就會(huì)收集一次熒光信號(hào),實(shí)時(shí)檢測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。用熒光定量PCR法檢測(cè)目的基因僅需檢測(cè)樣本是否具有擴(kuò)增信號(hào)即可,且PCR反應(yīng)具有核酸擴(kuò)增的高1效性,可檢測(cè)出微小突變。根據(jù)探針標(biāo)記不同可分為TaqMan探針法和ARMS法。

后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),分子病理技術(shù)服務(wù),含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。

原位雜交的預(yù)雜交:濕盒的準(zhǔn)備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預(yù)雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時(shí)。吸取多余液體,不洗。

雜交——按每張切片20μι雜交液,加在切片上。將原位雜交專1用蓋玻片的保護(hù)膜揭開后,蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過(guò)夜(根據(jù)雜交情況可以調(diào)節(jié))。

雜交后洗滌:揭掉蓋玻片,37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次;37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色,重復(fù)0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。

科銳諾生物科技-分子病理技術(shù)服務(wù)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司位于湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的浪潮中拼博和發(fā)展,目前科銳諾在技術(shù)合作中享有良好的聲譽(yù)。科銳諾取得全網(wǎng)商盟認(rèn)證,標(biāo)志著我們的服務(wù)和管理水平達(dá)到了一個(gè)新的高度。科銳諾全體員工愿與各界有識(shí)之士共同發(fā)展,共創(chuàng)美好未來(lái)。

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