






外泌體(Exosome)是活1細胞分泌的來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體)的膜性囊泡,存在于體液中,包括血液、唾液、尿液羊水等多種體液中,并攜帶有母細胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、RNA等重要信息,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能,是細胞和細胞間信息傳遞的重要方式。
體液中外泌體 RNA(特別是 miRNA 等非編碼 RNA)在健康與癌1癥中存在明顯 的表達差異。因此外泌體里的 miRNA 常常成為某些疾病的 biomarker。

外泌體分離提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速離心法;
適用于細胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣品;
2、基于PEG沉淀原理的試劑盒法;
適用于血1清、腦脊液等小體積的樣品;
3、超濾提取法;
適用于細菌培養(yǎng)液或外泌體含量較低的樣品濃縮。亦可搭配超1速離心法,做進一步的提取。
外泌體是細胞外囊泡的一種,其膜來源與粒徑范圍與細胞外囊泡相似,電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。實際操作中,通過常規(guī)的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態(tài)、粒徑、表面分子標記物等多方面的鑒定。具體方法包括:透射電鏡(形態(tài)鑒定)、NTA檢測(粒徑及濃度鑒定)、WB(分子標志物)。NTA檢測作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一,可同時反映出檢測樣品的濃度及粒徑。質(zhì)量較好,純度較高的外泌體樣品,粒徑分布在30-150nm,原液濃度在10^9左右。為了保證檢測質(zhì)量,對每一個樣品,都會進行3次技術(shù)重復。檢測周期為2-3個工作日,可當天到樣當天出結(jié)果。

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