





原位末端凋亡檢測(Tunel)
實驗原理: TUNEL技術(shù)可對組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色,能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點,利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端,再用組化法或熒光檢測凋亡細(xì)胞。

結(jié)1核病是嚴(yán)重威脅人類健康的傳1染性疾病,每年約有200萬人死于該病,其死1亡率在傳1染性疾病中僅低于艾1滋病,隨著醫(yī)1療診斷技術(shù)的迅猛發(fā)展,結(jié)1核病病理診斷經(jīng)歷了單一形態(tài)學(xué)和聯(lián)合特殊染色,到如今利用分子病理基因檢測技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的三個階段。
我科早在全1國建立了系統(tǒng)性結(jié)1核病分子病理診斷技術(shù)的平臺,率1先將分子病理診斷技術(shù)在結(jié)1核病中應(yīng)用并推廣,解決了傳統(tǒng)病理對菌陰肺結(jié)1核及肺外結(jié)1核病的診斷率低、結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病無法鑒別以及耐藥結(jié)1核病無法診斷等難題。同時,我科作為中華醫(yī)學(xué)會結(jié)1核病學(xué)分會金1牌病理培訓(xùn)基地,負(fù)責(zé)組織制定了結(jié)1核病病理診斷規(guī)范、培訓(xùn)了大量的專1業(yè)技術(shù)人員,為形成結(jié)1核病病理學(xué)綜合診治新模式做出了卓1越貢獻(xiàn)!

tunel流式細(xì)胞凋亡檢測服務(wù)通常稱為細(xì)胞程序性死1亡,是由基因控制的主動性細(xì)胞死1亡過程。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān),如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力,利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫1瘤診斷,療1效評價和預(yù)后預(yù)測提供了重要的參考指標(biāo)。
TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細(xì)胞在凋亡早期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況,其原理是生物素biotinylate標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的鏈霉親和素streptavidin特異性結(jié)合,后者又與POD底物H2O2、二氨1基聯(lián)1苯1胺(DAB)產(chǎn)生深棕色反應(yīng),特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,染色體原位雜交經(jīng)驗的公司,因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞;由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA斷裂,因而沒有3‘-OH形成,很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細(xì)胞樣本(細(xì)胞涂片)在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測。還可應(yīng)用于抗腫1瘤藥的藥1效評價,以及通過雙色法確定細(xì)胞類型和分化階段。

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