





鐵死亡(Ferroptosis)早由哥倫比亞大學Dr. Brent R.Stockwell在2012年提出,是一種鐵依賴性的,區別于細胞凋亡、細胞壞死、細胞自噬的新型的細胞程序性死亡方式。鐵死亡的的本質是谷1胱1甘1肽的耗竭,谷1胱1甘1肽過氧化物酶(GPX4)活性降低,
脂質氧化物不能通過GPX4催化的谷1胱甘肽還原酶反應代謝,之后二價的鐵離子氧化脂質產生活性氧,從而促使鐵死亡的發生。

外泌體分離提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速離心法;
適用于細胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣品;
2、基于PEG沉淀原理的試劑盒法;
適用于血1清、腦脊液等小體積的樣品;
3、超濾提取法;
適用于細菌培養液或外泌體含量較低的樣品濃縮。亦可搭配超1速離心法,做進一步的提取。
外泌體是細胞外囊泡的一種,其膜來源與粒徑范圍與細胞外囊泡相似,電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結構。實際操作中,通過常規的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態、粒徑、表面分子標記物等多方面的鑒定。具體方法包括:透射電鏡(形態鑒定)、NTA檢測(粒徑及濃度鑒定)、WB(分子標志物)。NTA檢測作為外泌體鑒定的經典方法之一,可同時反映出檢測樣品的濃度及粒徑。質量較好,外泌體miRNA測序服務,純度較高的外泌體樣品,粒徑分布在30-150nm,原液濃度在10^9左右。為了保證檢測質量,對每一個樣品,都會進行3次技術重復。檢測周期為2-3個工作日,可當天到樣當天出結果。


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