玉米原位雜交檢測技術服務-科銳諾(推薦商家)
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武漢科銳諾生物科技有限公司
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原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術 經不斷改進,玉米原位雜交檢測技術服務,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

1、組織取材:組織取材應盡可能新鮮。由于組織RNA降解較快,所以新鮮組織和培養細胞在30 min 內固定。
2、細胞組織固定目的與注意事項:
(1)保持細胞結構;
(2)大限度地保持細胞內DNA或RNA的水平;
(3)使探針易于進入細胞或組織。
常用的固定劑是多聚甲醛,與其它醛類固定劑不同,多聚甲醛不會與蛋白質產生廣泛的交叉連接,因而不會影響探針穿透入細胞或組織。

分子病理應用的檢測樣本主要包括石蠟組織、新鮮組織、脫落細胞、全血及其他體液等。石蠟切片標本厚度應在4-6μm,切片數量依據組織大小而定。樣本質量對檢測結果和分析至關重要,病理醫師需要對可評估的樣本進一步明確病理診斷,并評價標本有無出血、壞死和不利于核酸檢測的前處理(例如含HCl脫鈣液處理),病變細胞(如細胞)的總量和比例,避免假陰性。進行NGS檢測前需通過病理診斷明確其的性質及含量,根據不同類型選擇合適的基因panel測序。組織標本中細胞含量建議達到20%以上,低于此標準可富集后檢測。未經病理評估的基因檢測結果不可單獨用于分子病理臨床診斷目的。

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