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主營(yíng):原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選

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貝科新肽(多圖)-熒光原位雜交

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這一原理對(duì)于檢測(cè)一個(gè)特異的mRNA在某一種生物體,或者某些組織切片、單個(gè)細(xì)胞里具體表達(dá)位置非常有用。該技術(shù)早應(yīng)用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,并可定位,因此該技術(shù)已被廣泛應(yīng)用,例如與細(xì)胞內(nèi)RNA進(jìn)行雜交以觀察該組織細(xì)胞中特定基因表達(dá)水平。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對(duì)于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA研究更為方便;同時(shí)由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對(duì)于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保持組織與細(xì)胞的形態(tài),更能準(zhǔn)確地反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。

預(yù)雜交

1)每個(gè)管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。

2)用等體積的HYB+取代HYB-。

3)60℃水浴,預(yù)雜交4小時(shí)以上。

雜交

1)吸去預(yù)雜交的HYB+,加上100ul已加入探針的HYB+溶液(探針濃度約為1ng/ul)..

2)60℃ 溫浴過(guò)夜。

注:雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等,溫度越低,探針結(jié)合越好,熒光原位雜交,溫度越高,背景越小。

原位雜交是一項(xiàng)非常重要的生物技術(shù),可以用于研究基因表達(dá)和調(diào)控,檢測(cè)基因變異和染色體異常,監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡,以及識(shí)別特定的細(xì)胞類(lèi)型或組織。然而,它需要特殊的操作技術(shù)和設(shè)備,以及嚴(yán)格的對(duì)照實(shí)驗(yàn)才能獲得可靠的結(jié)果。

原位雜交是一項(xiàng)非常重要的生物技術(shù),可以用于研究基因表達(dá)和調(diào)控,檢測(cè)基因變異和染色體異常,監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡,以及識(shí)別特定的細(xì)胞類(lèi)型或組織。然而,它需要特殊的操作技術(shù)和設(shè)備,以及嚴(yán)格的對(duì)照實(shí)驗(yàn)才能獲得可靠的結(jié)果。

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