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湖北熒光原位雜交-武漢貝科新肽科技公司(圖)

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原位雜交法是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行定量定位的方法。原位雜交法可以在細胞標本或組織標本上進行。另有熒光原位雜交使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。

原位雜交技術可以應用于以下場景:

組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如,可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA等。

癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達及其變化的檢測。

檢測染色體的變化,熒光原位雜交,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。

在植物基因組研究中的應用。例如,通過與特定基因序列的探針進行雜交,可以在植物染色體上定位到目標基因的位置,進而構(gòu)建遺傳圖譜,為植物育種和基因組研究提供基礎數(shù)據(jù)。

和其它實驗方法一樣,必須同時設對照試驗以證明其實驗結(jié)果特異性。對照試驗的設置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點是它的高度特異性,它可測定組織、培養(yǎng)的單個細胞或細胞提取物中的核苷酸含量。應用高敏感度的性標記cRNA探針在理想的ISHH的實驗條件下檢測mRNA,其敏感度可達到20個mRNA拷貝/每個細胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性,在用ISHH定位DNA時很少發(fā)生丟失,降解,其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上,有時甚至在組織切片上的單個基因拷貝。正因為如此,對ISHH結(jié)果的解釋應持慎重態(tài)度,特別是前人未報告過的新發(fā)現(xiàn)。

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