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原位雜交
實驗原理
原位雜交技術(shù)（in situhybridization）是以標(biāo)記的核酸分子為探針，在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。
使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針，在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交，再以自顯影或細胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進行探測，從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
染色體原位雜交實驗的基本原理是利用特定標(biāo)記的已知堿基序列的核酸探針，依據(jù)堿基互補配對原理，與中期染色體玻片標(biāo)本中的同源 DNA 序列進行雜交。
標(biāo)記可以用放1射性同位素（3H、35S、32P），然后進行放1射自顯影；也可以用非放1射性的熒光素生物素、地1高辛，再用熒光顯微鏡進行觀察，即熒光原位雜交（fluorescent in situhybridization，F(xiàn)ISH）技術(shù)。
在酵母雙雜交系統(tǒng)中，BD與X蛋白融合，AD與Y蛋白融合，植物葉片原位雜交技術(shù)服務(wù)，如果X、Y之間形成蛋白-蛋白復(fù)合物，AD與BD會在空間上充分接近，重新構(gòu)成結(jié)構(gòu)域，啟動報告基因的轉(zhuǎn)錄。擁有BD質(zhì)粒的酵母可以在某一缺陷培養(yǎng)基上生長，擁有AD質(zhì)粒的酵母菌可以在另一種缺陷培養(yǎng)基上生長，通過接合（mating）或共轉(zhuǎn)化使酵母同時擁有AD與BD質(zhì)粒。如果BD上的目的蛋白與AD上的誘餌蛋白存在相互作用，這樣的酵母可以在三缺及四缺的培養(yǎng)基上生長，并啟動β-半乳糖苷酶基因的轉(zhuǎn)錄。
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第4年
