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科銳諾生物(多圖)-植物組織RNA原位雜交技術服務

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分子病理學診斷主要應用于以下幾個方面:1、對于腫l瘤易感基因的檢測,對于腫l瘤高危人群的篩檢具有實用價值,如檢測GSTπ基因以判定個體暴露于致癌物是的致癌危險性。2、腫l瘤相關病毒的檢測,如采用原位雜交方法檢測標本中HPV、EBER等病毒。3、疑難腫l瘤的診斷和分類,尤其在鑒別診斷淋巴細胞增l生性疾病與淋巴細胞性腫l瘤上有著強大的特異性和可靠性。4、腫l瘤的個體化治l療,能夠根據腫l瘤發生l發展不同階段分子水平的特點,對腫l瘤的個體化和預見性治l療具有指導意義。5、腫l瘤的預后判斷,如采用熒光原位雜交技術(FISH)檢測HER-2基因在乳l腺l癌病例中的表達情況,配合術后治l療,指導臨床用藥選擇。

.雜交 (1) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉到200ml預洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養箱內的旋轉平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。(4) 將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預雜交1-2小時。(5) 將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,盛濾膜的容器應蓋嚴,植物組織RNA原位雜交技術服務,以防液體蒸發。

原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交,使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。

       原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物

       

科銳諾生物(多圖)-植物組織RNA原位雜交技術服務由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司位于湖北省武漢市江夏區神墩四路666號武漢國英種子A棟1樓。在市場經濟的浪潮中拼博和發展,目前科銳諾在技術合作中享有良好的聲譽。科銳諾取得全網商盟認證,標志著我們的服務和管理水平達到了一個新的高度。科銳諾全體員工愿與各界有識之士共同發展,共創美好未來。

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