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外泌體研究開展的如火如荼。不論是 SCI 文章的發(fā)表還是各類基1金的申請，外泌體相關(guān)研究表現(xiàn)都非常亮眼。外泌體提取后，研究人員面臨的一個重要問題就是，我提取的是不是外泌體？如果是的話，質(zhì)量如何？
現(xiàn)階段，對外泌體進(jìn)行鑒定主要有三種主流的方法：電鏡、粒徑和 Western blot 分析靶標(biāo)物。之前我們已經(jīng)對外泌體電鏡進(jìn)行了總結(jié)，胞外囊泡粒徑及濃度檢測，今天我們來看看外泌體的粒徑分析。
外泌體粒徑分析原理
外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析（Nanoparticle tracking Analysis， NT A)，其原理是對每個顆粒的布朗運動進(jìn)行追1蹤和分析，結(jié)合 Stockes-Einstein 方程式計算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度。NT A技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式，NT A技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。
除了用NTA方法，該團(tuán)隊另基于acetylcholinesterase（一種已知的外泌體表達(dá)蛋白）評估三種試劑盒提取外泌體的得率。從NTA結(jié)果看，對于血1清和血漿樣本，Exo-spin的提取量高，是其他兩種試劑盒的1-3倍；相對來說，腦脊髓液的提取率都比較低，ExoQuick?提取得到的外泌體濃度低。從基于acetylcholinesterase的分析結(jié)果看，其數(shù)值高于NTA方法，且Exo-spin得到的外泌體濃度高于其他兩種試劑盒。
自噬是一個吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程，借此實現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。自噬體，其直徑一般為 300 ~ 900 nm，平均 500 nm，囊泡內(nèi)常見的包含物有胞質(zhì)成分和某些細(xì)胞器如線粒體、內(nèi)吞體、過氧化物酶體等。與其他細(xì)胞器相比，自噬體的半衰期很短，只有 8 min 左右，說明自噬是細(xì)胞對于環(huán)境變化的有效反應(yīng)。
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