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熒光原位雜交-武漢貝科新肽科技公司(圖)

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植物原位雜交在遺傳育種方面的應用主要包括:

檢測物種或品種特異性:通過植物原位雜交技術可以檢測出不同物種或品種之間基因表達的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據。

遺傳育種:通過植物原位雜交技術可以檢測到不同品種之間基因表達的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如,通過將特定的外源基因導入到植物細胞中,然后利用原位雜交技術檢測該基因在植物細胞中的位置和表達情況,為遺傳育種提供重要的參考信息。

和其它實驗方法一樣,必須同時設對照試驗以證明其實驗結果特異性。對照試驗的設置須根據核酸探針和靶核苷酸的種類和現有的可能條件去選定。ISHH的優點是它的高度特異性,它可測定組織、培養的單個細胞或細胞提取物中的核苷酸含量。應用高敏感度的性標記cRNA探針在理想的ISHH的實驗條件下檢測mRNA,其敏感度可達到20個mRNA拷貝/每個細胞。由于雙鏈DNA的穩定性,熒光原位雜交,在用ISHH定位DNA時很少發生丟失,降解,其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上,有時甚至在組織切片上的單個基因拷貝。正因為如此,對ISHH結果的解釋應持慎重態度,特別是前人未報告過的新發現。

而是對完整的斑馬魚胚胎進行探針雜交及檢測,從整體上把握探針的結合部位,然后對胚胎進行切片,以確定探針結合的具體位置。整胚原位雜交在斑馬魚分子生物學研究中是一種非常重要的實驗方法,原位雜交的探針可以是同位素的探針,用自顯影來檢測;也可以是非同位素的探針,通過熒光或酶法予以檢測。我們這兒所介紹的一種原位雜交的方法是通過后者,以標記探針,然后用酶聯的方法進行檢測。

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