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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交檢測(cè)-原位雜交-武漢貝科新肽公司

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原位雜交第二天

1.

1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。

2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。

3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。

4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。

2.

1)用MABT洗兩次,每次五分鐘,原位雜交,放在搖床輕輕搖動(dòng)。

2)室溫下加1ml 1:2:7溶液,時(shí)間為一小時(shí)。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連,原位雜交檢測(cè),4C 冰箱過夜。

多彩色熒光原位雜交技術(shù)多彩色熒光原位雜交(Multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)是在熒光原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù),它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交,能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶位,各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同,ISH,呈現(xiàn)多種色彩,因而被稱為多彩色熒光原位雜交。它克服了FISH技術(shù)的局限,能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因,在檢測(cè)遺傳物質(zhì)的突變和染色體上基因定位等方面得到了廣泛的應(yīng)用

FISH技術(shù)的基本步驟包括探針制備、樣品預(yù)處理、探針與樣品的雜交、信號(hào)檢測(cè)和圖像分析等。在探針制備過程中,使用熒光標(biāo)記物代替同位素標(biāo)記物來標(biāo)記探針。在樣品預(yù)處理過程中,動(dòng)物組織原位雜交,細(xì)胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質(zhì)等操作都是必要的,以提高探針與目標(biāo)序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中,探針與樣品中的目標(biāo)序列進(jìn)行互補(bǔ)性雜交,形成可檢測(cè)的熒光信號(hào)。在信號(hào)檢測(cè)和圖像分析過程中,使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測(cè)熒光信號(hào)并獲取高分辨率的細(xì)胞圖像。

原位雜交檢測(cè)-原位雜交-武漢貝科新肽公司由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司是從事“原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選”的企業(yè),公司秉承“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng),用心服務(wù)”的理念,為您提供更好的產(chǎn)品和服務(wù)。歡迎來電咨詢!聯(lián)系人:夏先生。

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